Multipleksni komplet za PCR v realnem času za nov Coronavirus (SARS-CoV-2).
Ta zelo občutljiv komplet za PCR, pripravljen za uporabo, je na voljo v liofilizirani obliki (postopek sušenja z zamrzovanjem) za dolgotrajno shranjevanje.Komplet je mogoče prevažati in hraniti pri sobni temperaturi in je stabilen eno leto.Vsaka epruveta premiksa vsebuje vse reagente, potrebne za pomnoževanje PCR, vključno z reverzno transkriptazo, Taq polimerazo, primerji, sondami in substrati dNTP.Dodati je treba le 13 ul destilirane vode in 5 ul ekstrahirane RNA predloge, nato pa jo lahko zaženete in pomnožite na instrumentih PCR.
Naprava qPCR mora izpolnjevati naslednje zahteve:
1. Namestite 8-trakovno cev za PCR volumna 0,2 ml
2. Imajo več kot štiri kanale za zaznavanje:
| kanal | vzbujanje (nm) | Emisija (nm) | Vnaprej kalibrirana barvila |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Zelena I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RDEČA |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR platforme:
7500 PCR sistem v realnem času, Biorad CF96, sistem za odkrivanje PCR v realnem času iCycler iQ™, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Težavnost transporta hladne verige reagenta za odkrivanje nukleinske kisline novega koronavirusa
Ko se običajni reagenti za odkrivanje nukleinske kisline prevažajo na dolge razdalje, sta potrebna hladilna veriga (-20±5) ℃ za shranjevanje in transport, da se zagotovi, da bioaktivnost encima v reagentih ostane aktivna.Za zagotovitev, da temperatura doseže standard, je potrebnih več kilogramov suhega ledu za vsako škatlo reagenta za testiranje nukleinske kisline, tudi manj kot 50 g, vendar lahko traja le dva ali tri dni.Z vidika industrijske prakse je dejanska teža reagentov, ki jih izdajo proizvajalci, manjša od 10 % (ali precej manjša od te vrednosti) posode.Večina teže prihaja iz suhega ledu, ledenih vrečk in škatel iz pene, zato so stroški prevoza izjemno visoki.
Marca 2020 je COVID-19 začel v velikem obsegu izbruhniti v tujini in povpraševanje po reagentu za odkrivanje nukleinske kisline novega koronavirusa se je dramatično povečalo.Kljub visokim stroškom izvoza reagentov v hladni verigi ga večina proizvajalcev zaradi velike količine in visokega dobička še vedno lahko sprejme.
Vendar pa se z izboljšanjem nacionalnih izvoznih politik za protipandemične izdelke ter nadgradnjo nacionalnega nadzora nad pretokom ljudi in logistike podaljšujeta in negotovost v času prevoza reagentov, kar je povzročilo vidne težave pri izdelku. s prevozom.Podaljšan čas transporta (čas prevoza približno pol meseca je zelo pogost) vodi do pogostih okvar izdelka, ko izdelek pride do naročnika.To je vznemirilo večino podjetij za izvoz reagentov nukleinskih kislin.
Liofilizirana tehnologija za PCR reagent je pomagala pri transportu reagenta za odkrivanje nukleinske kisline novega koronavirusa po vsem svetu
Liofilizirane PCR reagente je mogoče prevažati in shraniti pri sobni temperaturi, kar lahko ne le zmanjša stroške prevoza, ampak se tudi izogne težavam s kakovostjo, ki jih povzroča transportni proces.Zato je liofilizacija reagenta najboljši način za reševanje problema izvoznega transporta.
Liofilizacija vključuje zamrzovanje raztopine v trdno stanje, nato pa sublimiranje in ločevanje vodne pare v vakuumu.Posušena raztopina ostane v posodi z enako sestavo in aktivnostjo.V primerjavi z običajnimi tekočimi reagenti ima polnokomponentni liofilizirani reagent za odkrivanje nukleinskih kislin Novel Coronavirus, ki ga proizvaja Liming Bio, naslednje značilnosti:
Izjemno močna toplotna stabilnost:lahko 60 dni stoji pri 56 ℃, morfologija in zmogljivost reagenta pa ostaneta nespremenjena.
Skladiščenje in transport pri normalni temperaturi:ni potrebe po hladilni verigi, ni treba hraniti pri nizki temperaturi pred odpiranjem, popolnoma sprostite hladilni prostor.
Pripravljeno za uporabo:liofilizacija vseh komponent, brez potrebe po konfiguraciji sistema, izogibanje izgubi komponent z visoko viskoznostjo, kot je encim.
Multipleksne tarče v eni cevi:cilj odkrivanja zajema nov gen ORF1ab koronavirusa, gen N, gen S, da se izognemo genovariaciji virusa.Za zmanjšanje lažno negativnih se kot notranja kontrola uporablja gen humane RNaze P, da se izpolni klinična potreba po nadzoru kakovosti vzorcev.
