Nov koronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex PCR komplet v realnem času
Ta zelo občutljiv, pripravljen PCR komplet za uporabo je na voljo v liofiliziranem formatu (postopek sušenja z zamrzovanjem) za dolgoročno shranjevanje. Komplet se lahko prevaža in shrani pri sobni temperaturi in je stabilen eno leto. Vsaka cev Premix vsebuje vse reagente, potrebne za amplifikacijo PCR, vključno z reverzno transkriptazo, TAQ polimerazo, prajmeri, sondami in podlagami DNTPS. Potrebno je le dodati 13UL destilirano vodo in 5UL ekstrahirano predlogo RNA, nato pa jo lahko zaženete in ojačate na PCR instrumentih.
Stroj QPCR mora izpolnjevati naslednje zahteve:
1
2. imajo več kot štiri kanale za odkrivanje:
| Kanal | Vzbujanje (nm) | Emisija (nm) | Vnaprej kalibrirana barvila |
| 1. | 470 | 525 | Fam, sybr zelena i |
| 2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
| 3. | 571 | 621 | Rox, Teksas-rdeča |
| 4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-Platforms:
7500Real-Time PCR sistem, Biorad CF96, Icycler IQ ™ v realnem času zaznavanje PCR, stratagene MX3000P, MX3005P
Težavnost prevoza hladne verige novega reagenta za odkrivanje nukleinske kisline koronavirus
Kadar se običajni reagenti za odkrivanje nukleinske kisline prevažajo na dolge razdalje, je potrebno, da se bioaktivni encim v reagentih ostaja aktiven (-20 ± 5) shranjevanje in prevoz hladne verige. Za zagotovitev, da temperatura doseže standard, je za vsako škatlo reagenta za testiranje nukleinske kisline potrebnih več kilogramov suhega ledu, ki je manj kot 50 g, vendar lahko traja le dva ali tri dni. Na perspektivi industrijske prakse je dejanska teža reagentov, ki jih izdajo proizvajalci, manjša od 10% (ali veliko manj od te vrednosti) vsebnika. Večina teže izvira iz suhega ledu, ledu in penastih škatel, zato so stroški prevoza izjemno visoki.
Marca 2020 se je Covid-19 v velikem obsegu začelo izbruhniti v tujini, povpraševanje po novem reagentu za odkrivanje nukleinske kisline koronavirusa pa se je močno povečalo. Kljub visokim stroškom izvoza reagentov v hladni verigi ga večina proizvajalcev še vedno sprejme zaradi velike količine in visokega dobička.
Vendar z izboljšanjem nacionalnih izvoznih politik za protipandemične izdelke in nadgradnjo nacionalnega nadzora nad tokom ljudi in logistike obstajata razširitev in negotovost v času prevoza reagentov, kar je povzročilo vidne težave z izdelki s prevozom. Podaljšani čas prevoza (čas prevoza približno pol meseca je zelo pogost) vodi do pogostih okvar izdelka, ko izdelek doseže stranko. To je motilo večino nukleinskih kislinskih reagentov izvoza.
Liofilizirana tehnologija za PCR reagent je pomagala pri prevozu novega reagenta za odkrivanje nukleinske kisline koronavirusa po vsem svetu
Liofilizirane PCR reagente se lahko prevažajo in shranijo pri sobni temperaturi, kar ne more samo znižati stroškov prevoza, ampak tudi preprečiti težave s kakovostjo, ki jih povzroča postopek prevoza. Zato je liofilizacija reagenta najboljši način za reševanje problema izvoznega prevoza.
Liofilizacija vključuje zamrzovanje raztopine v trdno stanje, nato pa pod vakuumsko stanje sublimate in ločite vodno paro. Posušena topka ostane v posodi z isto sestavo in aktivnostjo. V primerjavi z običajnimi tekočimi reagenti ima polno komponenta liofilizirana nov reagent za odkrivanje nukleinske kisline koronavirus, ki ga proizvaja Liming BIO, naslednje značilnosti:
Izjemno močna toplotna stabilnost:Lahko z zdravljenjem s stojnico pri 56 ℃ 60 dni, morfologija in uspešnost reagenta pa ostaneta nespremenjena.
Normalno shranjevanje in prevoz temperature:Ni potrebe po hladni verigi, pred odpiranjem ni treba shranjevati pri nizki temperaturi, v celoti sprostite prostor za shranjevanje v hladilniku.
Pripravljen za uporabo:Liofilizacija vseh komponent, ni potrebe po konfiguraciji sistema in se izognil izgubi komponent z visoko viskoznostjo, kot je encim.
Multipleksni cilji v eni cevi:Cilj odkrivanja zajema nov koronavirusni gen Orf1AB, n gen, S gena, da se izognete generizaciji virusa. Da bi zmanjšali lažno negativno, se človeški gen RNase P uporablja kot notranji nadzor, tako da ustreza klinični potrebi po nadzoru kakovosti vzorca.
