En svet en boj
─ Internativno sodelovanje za gradnjo globalne skupnosti skupne usode, ki se odziva na covid-19 pandemične izzive
Nov koronavirus, ki je pometal po vsem svetu, je povzročil stalno globalno pandemično krizo Covid-19. Novela Coronavirus nima meja, nobena država ne bo prizanesla te bitke proti Covidu-19. Kot odgovor na to svetovno pandemijo Covid-19, Liming Bio-Products Corp prispeva k podpori dobrega počutja naših svetovnih skupnosti.
Naš svet se trenutno sooča z brez primere vpliva nove pandemije Coronavirus Disease 2019 (Covid-19). Do danes ni na voljo učinkovitega zdravila za zdravljenje te bolezni. Vendar je bilo za odkrivanje Covid-19 razvitih veliko diagnostičnih testov. Ti testi temeljijo na molekularnih ali seroloških metodah za odkrivanje novih biomarkerjev nukleinske kisline ali protiteles, specifičnih za koronavirus. Ker je Covid-19 dosegel pandemični status, je zgodnja diagnoza nove koronavirusne okužbe ključna pri ocenjevanju širjenja virusa in njenem zadrževanju, vendar popoln test za univerzalno uporabo še ne obstaja. Vedeti moramo, katere teste bi lahko uporabili za presejanje, diagnozo in spremljanje okužbe s Covid-19 in kakšne so njihove omejitve. Zelo pomembno je, kako bolje uporabiti ta znanstvena orodja in pomagati prepoznati in nadzorovati nastanek te hitro širjenja in resne bolezni.
Namen odkrivanja novega koronavirusa je ugotoviti, ali ima posameznik, ki ima kovid-19 okužbo ali asimptotični prevoznik, ki lahko tiho širi virus, da zagotovi bistvene informacije za usmerjanje odločanja za klinično zdravljenje. Prejšnje študije so pokazale, da je 70% kliničnih odločitev odvisno od rezultatov testiranja. Kadar se uporabljajo različne metode zaznavanja, so tudi zahteve kompletov za odkrivanje reagentov tudi različne.
Slika 1
Slika1:Diagram, ki prikazuje ključne faze splošnih ravni biomarkerjev v tipičnem časovnem poteku okužbe s kovidom-19. Osi X kaže na število dni okužbe, osi Y pa kaže na virusno obremenitev, koncentracijo antigenov in koncentracijo protiteles v različnih obdobjih. Protitelo se nanaša na protitelesa IgM in IgG. Za odkrivanje prisotnosti ali odsotnosti novega koronavirusa se uporabljata tako RT-PCR kot antigen, kar je neposreden dokaz za zgodnje odkrivanje bolnikov. V enem tednu po virusni okužbi je prednostno odkrivanje PCR ali odkrivanje antigena. Po novi koronavirusni okužbi približno 7 dni se je protitelo IGM proti novemu koronavirusu postopoma povečevalo v bolnikovi krvi, vendar je trajanje obstoja kratko, njegova koncentracija pa se hitro zmanjša. V nasprotju s tem se protitelo IgG proti virusu pojavi pozneje, običajno približno 14 dni po okužbi z virusom. Koncentracija IgG se postopoma povečuje in traja dolgo obdobje v krvi. Če torej IGM odkrijemo v bolnikovi krvi, to pomeni, da se je virus pred kratkim okužil, kar je označevalec zgodnje okužbe. Ko se protitelesa IgG odkrije v bolnikovi krvi, to pomeni, da je virusna okužba že nekaj časa. Imenuje se tudi pozno okužbo ali prejšnjo okužbo. Pogosto ga opazimo pri bolnikih, ki so v fazi okrevanja.
Biomarkerji romana koronavirusa
Nov koronavirus je virus RNA, ki je sestavljen iz beljakovin in nukleinskih kislin. Virus vdre v gostiteljsko (človeško) telo, vstopi v celice skozi vezavno mesto ustreznega receptorja ACE2 in se razmnožuje v gostiteljskih celicah, zaradi česar se človeški imunski sistem odzove na tuje napadalce in proizvaja specifična protitelesa. Zato se lahko viala nukleinska kislina in antigeni ter specifična protitelesa proti novim koronavirusom teoretično uporabijo kot specifični biomarkerji za odkrivanje novega koronavirusa. Za odkrivanje nukleinske kisline je najpogosteje uporabljena tehnologija RT-PCR, serološke metode pa se običajno uporabljajo za odkrivanje novih koronavirusnih protiteles. Trenutno so na voljo različne preskusne metode, ki jih lahko izberemo za testiranje okužbe s Covid-19 [1].
Osnovna načela glavnih preskusnih metod za nove koronavirus
Številni diagnostični testi za Covid_19 so na voljo do zdaj, pri čemer je več testnih kompletov vsak dan prejelo odobritev v skladu z dovoljenjem za nujne primere. Čeprav se novi testni dogodki pojavljajo s toliko različnimi imeni in formatom, se vsi trenutni testi Covid_19 v bistvu zanašajo na dve glavni tehnologiji: odkrivanje nukleinske kisline za virusno RNA in serološke imunološke testi, ki zaznajo protitelesa, specifična za virusa (IgM in IgG).
01. Zaznavanje nukleinske kisline
Vzvratna transkripcijska-polimerazna verižna reakcija (RT-PCR), izotermalna amplifikacija, posredovana z zanko (LAMP) in zaporedje naslednje generacije (NGS), so običajne metode nukleinske kisline za odkrivanje nove koronavirusne RNA. RT-PCR je prva vrsta testa za COVID-19, ki ga priporočata tako Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) kot tudi ZDA za nadzor in preprečevanje bolezni (CDC).
02.Serološko odkrivanje protiteles
Protitelo je zaščitni protein, ki nastane v človeškem telesu kot odgovor na okužbo z virusom. IgM je zgodnja vrsta protiteles, medtem ko je IgG kasnejši protiteles. Vzorec seruma ali plazme običajno pregledamo glede na prisotnost specifičnih vrst IgM in IgG protitelesa za oceno akutne in rekonvalescenčne faze okužbe s kovid-19. Te metode detekcije na osnovi protiteles vključujejo test koloidne imunokromatografije z zlatom, lateks ali fluorescentno mikrosferno imunokromatografijo, encimsko vezano imunosorbentno test (ELISA) in hemiluminiscenčni test.
03.Viralno odkrivanje antigena
Antigen je struktura virusa, ki ga prepozna človeško telo, ki sproži sistem imunske obrambe, da proizvaja protitelesa za čiščenje virusa iz krvi in tkiv. Virusni antigen, ki je prisoten na virusu, je mogoče usmeriti in zaznati z uporabo imunološkega testov. Tako kot virusna RNA so tudi virusni antigeni prisotni tudi v dihalnih traktah okuženih posameznikov in se lahko uporabijo za diagnosticiranje akutne faze okužbe s kovid-19. Zato je pogosto priporočljivo zbirati vzorce zgornjih dihal, kot so slina, nazofaringealni in orofaringealni brisi, globok kašelj sputum, bronhoalveolarna tekočina za izpiranje (BALF) za začetno testiranje antigena.
Izbira metod testiranja za nov koronavirus
Izbira metode testiranja vključuje številne dejavnike, vključno s kliničnimi nastavitvami, nadzorom kakovosti testiranja, časom preobrata, stroški testiranja, metodami zbiranja vzorčenja, tehničnimi zahtevami laboratorijskega osebja, zahtevami objekta in opreme. Zaznavanje nukleinskih kislin ali virusnih antigenov je zagotoviti neposredne dokaze o prisotnosti virusov in potrditi diagnozo nove koronavirusne okužbe. Čeprav obstaja veliko metod za odkrivanje antigena, je njihova občutljivost za odkrivanje novega koronavirusa teoretično nižja kot pri amplifikaciji RT-PCR. Testiranje protiteles je odkrivanje protivirusnih protiteles, ki nastanejo v človeškem telesu, ki zaostaja v času in ga pogosto ni mogoče uporabiti za zgodnje odkrivanje med akutno fazo okužbe z virusom. Klinična nastavitev za aplikacije za odkrivanje se lahko razlikuje, mesta za zbiranje vzorcev pa so lahko tudi različna. Za odkrivanje virusnih nukleinskih kislin in antigenov je treba vzorec zbrati v dihalnem traktu, kjer je virus prisoten, kot so nazofaringealni brisi, orofaringealni brisi, sputum ali bronhoalveolarne tekočine (BALF). Za odkrivanje na podlagi protiteles je treba zbrati in pregledan za prisotnost specifičnega protivirusnega protitelesa (IgM/IgG). Vendar se lahko rezultati testov protiteles in nukleinske kisline medsebojno dopolnjujejo. Na primer, kadar je rezultat testiranja nukleinska kislina negativna, IgM-negativna, vendar IgG-pozitivna, ti rezultati kažejo, da pacient trenutno ne nosi virusa, ampak je bil obnovljen iz nove okužbe koronavirusa. [2]
Prednosti in slabosti novih testov koronavirusa
V protokolu diagnoze in zdravljenja za novo koronavirusno pnevmonijo (preskusna različica7) (ki jo je 3. marca 2020 objavila Nacionalna zdravstvena komisija in državna uprava tradicionalne kitajske medicine) se testiranje nukleinske kisline uporablja kot zlata standardna metoda za diagnozo romana Okužba koronavirusa, medtem ko se testiranje protiteles šteje tudi za eno od potrditvenih metod za diagnozo.
Patogene in serološke ugotovitve
(1) Patogene ugotovitve: Novo koronavirusno nukleinsko kislino je mogoče zaznati v nazofaringealnih brisih, sputumu, izločanjih spodnjih dihal, krvi, iztrebkih in drugih vzorcih z uporabo metod RT-PCRAND/ali NGS. Natančneje je, če vzorce dobimo iz spodnjih dihalnih traktov (sputum ali ekstrakcija zračnega trakta). Vzorce je treba predložiti za testiranje čim prej po zbiranju.
(2) serološke ugotovitve: IgM, specifičen za virus NCP, postane zaznaven približno 3-5 dni po začetku; IgG doseže titracijo vsaj 4-kratnega povečanja med rekonvalescenco v primerjavi z akutno fazo.
Vendar je izbira metod testiranja odvisna od geografskih lokacij, medicinskih predpisov in kliničnih nastavitev. V ZDA so NIH izdali smernice za zdravljenje koronavirusne bolezni 2019 (Covid-19) (posodobljeno mesto: 21. aprila) in FDA je izdala politiko za diagnostične teste za koronavirusno bolezen med javnim zdravjem (izdano 16. marca 16. marca. ), v katerem serološko testiranje protiteles IgM/IgG, izbranih le kot presejalni test.
Metoda odkrivanja nukleinske kisline
RT_PCR je zelo občutljiv test nukleinske kisline, ki je zasnovan tako, da zazna, ali je v dihalnem ali drugem vzorcu prisotna nova koronavirusna RNA. Pozitiven rezultat PCR testa pomeni prisotnost nove koronavirusne RNA v vzorcu, da potrdi okužbo s kovidom-19. Negativni rezultat PCR testa ne pomeni odsotnosti okužbe z virusom, ker bi lahko vplivala slaba kakovost vzorca ali časovna točka bolezni v obnovljeni fazi itd. Čeprav je RT-PCR zelo občutljiv test, ima več pomanjkljivosti. RT-PCR testi so lahko delovno intenzivni in zamudni, kar je ključno odvisno od visoke kakovosti vzorca. To je lahko izziv, saj se količina virusne RNA ne razlikuje le med različnimi bolniki, ampak se lahko tudi razlikuje znotraj istega bolnika, odvisno od časovnih točk, ko se vzorec zbira, pa tudi faze okužbe ali pojav kliničnih simptomov. Zaznavanje novega koronavirusa zahteva visokokakovostne primerke, ki vsebujejo zadostno količino nepoškodovane virusne RNA.
RT-PCR test lahko daje napačen negativen rezultat (lažno negativno) za nekatere bolnike, ki imajo okužbo s kovidom-19. Kot vemo, so glavna mesta okužbe romana koronavirusa na pljučih in spodnjem dihalnem traktu, kot sta Alveoli in Bronchi. Zato ima vzorec sputuma iz globokega kašlja ali bronhoalveolarne izpiranje (BALF), za katerega se šteje, da ima največjo občutljivost za odkrivanje virusa. Vendar se v klinični praksi vzorce pogosto zbirajo iz zgornjega dihalnega trakta z uporabo nazofaringealnih ali orofaringealnih brisov. Zbiranje teh vzorcev ni samo neprijetno za bolnike, ampak tudi zahteva posebej usposobljeno osebje. Da bi vzorčenje manj invazivno ali lažje, lahko v nekaterih primerih bolniki dobijo oralni bris in jim omogočijo, da vzamejo vzorec iz bukalne sluznice ali jezika. Brez zadostne virusne RNA lahko RT-QPCR vrne lažno negativni rezultat testa. V provinci Hubei, Kitajska, je bila občutljivost RT-PCR v začetnem odkrivanju poročana le približno 30%-50%, v povprečju 40%. Visoko stopnjo lažno negativnih je najverjetneje povzročil nezadostno vzorčenje.
Poleg tega RT-PCR test zahteva visoko usposobljeno osebje, da izvede zapletene korake ekstrakcije RNA in postopek amplifikacije PCR. Zahteva tudi višjo raven zaščite pred biološko varnostjo, posebnega laboratorijskega objekta in instrumenta PCR v realnem času. Na Kitajskem je treba RT-PCR test za odkrivanje COVID-19 opraviti v laboratorijih za biološko varnost 2 (BSL-2), pri čemer je zaščita osebja z uporabo prakse biološke varnosti 3 (BSL-3). V skladu s temi zahtevami je bila od začetka januarja do začetka februarja 2020 zmogljivost laboratorija CDC CDC Kitajske Wuhana le odkrita le nekaj sto primerov na dan. Običajno to ne bi bil problem pri testiranju drugih nalezljivih bolezni. Vendar pa pri obravnavanju globalne pandemije, kot je Covid-19, s potencialno milijoni ljudi, ki jih je treba preizkusiti, postane RT-PCR kritično vprašanje zaradi njegovih zahtev za posebne laboratorijske zmogljivosti ali tehnično opremo. Te pomanjkljivosti lahko omejijo RT-PCR, ki se uporablja kot učinkovito orodje za presejanje, in lahko tudi privedejo do zamud v poročilih o rezultatih testiranja.
Metoda odkrivanja seroloških protiteles
Z napredkom tečaja bolezni, zlasti v srednji in pozni fazi, je stopnja odkrivanja protiteles zelo visoka. Študija v bolnišnici Wuhan Central South je pokazala, da bi lahko stopnja odkrivanja protiteles v tretjem tednu okužbe s kovidom-19 dosegla več kot 90%. Tudi protitelo je produkt človeškega imunskega odziva proti novemu koronavirusu. Test protiteles ponuja več prednosti pred RT-PCR. Prvič, serološka protitelesa preizkusi preprosta in hitro. Preskusi bočnega pretoka protiteles se lahko uporabijo za oskrbo z oskrbo, da se rezultat doseže v 15 minutah. Drugič, cilj, odkrit s serološkim testom, je protitelo, za katerega je znano, da je veliko bolj stabilno kot virusna RNA. Med zbiranjem, prevozom, shranjevanjem in testiranjem so vzorci za teste protiteles na splošno bolj stabilni kot vzorci za RT-PCR. Tretjič, ker je protitelo enakomerno porazdeljeno v krvnem obtoku, je v primerjavi s testom nukleinske kisline manj sprememb vzorčenja. Volumen vzorca, potreben za test protiteles, je razmeroma majhen. Na primer, 10 mikroliter krvi s prstom zadostuje za uporabo v preskusu bočnega pretoka protiteles.
Na splošno je test protiteles izbran kot dodatno orodje za odkrivanje nukleinske kisline za izboljšanje stopnje odkrivanja novega koronavirusa med tečaji bolezni. Kadar se test protiteles uporablja skupaj s testom nukleinske kisline, lahko poveča natančnost preizkusa za diagnozo CoviD19 z zmanjšanjem potencialnih lažno pozitivnih in lažno negativnih rezultatov. Trenutni vodnik za delovanje ne priporoča uporabe dveh vrst testa ločeno kot neodvisni format zaznavanja, vendar ga je treba uporabiti kot kombinirano obliko. [2]
Slika2:Pravilna interpretacija rezultatov preskusov nukleinske kisline in protiteles za odkrivanje nove okužbe s koronavirusom
Slika 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Nov koronavirusni IgM/IgG protitelesa dvojna hitra testna komplet (StrongStep®SARS-CoV-2 IGM/IgG protiteles Hitding test, imunokromatografija lateksa)
Slika 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Nov koronavirus (SARS-CoV-2) multipleksni PCR komplet v realnem času (odkrivanje za tri gene, metoda fluorescentne sonde).
Opomba:Ta zelo občutljiv, pripravljen PCR komplet za uporabo je na voljo v liofiliziranem formatu (postopek sušenja z zamrzovanjem) za dolgoročno shranjevanje. Komplet se lahko prevaža in shrani pri sobni temperaturi in je stabilen eno leto. Vsaka cev Premixa vsebuje vse ponore, potrebne za amplifikacijo PCR, vključno z reverzno transkriptazo, TAQ polimerazo, osnovnimi premazi, sondami in dNTPS podložnimi. na PCR instrument za zagon ojačitve.
Kot odgovor na nov izbruh koronavirusa je Liming Bio-Products Co., Ltd., hitro sodeloval pri razvoju dveh diagnostičnih kompletov, ki omogočajo klinične in javne zdravstvene laboratorije za hitro diagnosticiranje okužbe s CoVID-19. Ti kompleti so zelo primerni za uporabo za obsežne presejalne preglede v državah in regijah, kjer se novi izbruh koronavirusa hitro širi, in za zagotavljanje diagnoze in potrditve za okužbo s Covid-19. Ti kompleti so namenjeni le v okviru predhodno nepomembne dovoljenja za nujne primere (PEUA). Testiranje je omejeno na laboratorije, certificirane v skladu s predpisi nacionalnih ali lokalnih organov.
Metoda zaznavanja antigena
1. Virusno odkrivanje antigena je razvrščeno v isto kategorijo neposrednega odkrivanja kot odkrivanje nukleinske kisline. Te metode neposrednega odkrivanja iščejo dokaze o virusnih patogenih v vzorcu in jih je mogoče uporabiti za potrditveno diagnozo. Vendar pa razvoj kompletov za odkrivanje antigena zahteva visoko kakovost monoklonskih protiteles z močno afiniteto in visoko občutljivostjo, ki lahko prepozna in zajame patogene viruse. Običajno traja več kot šest mesecev, da izberete in optimiziramo monoklonsko protitelo, primerno za uporabo pri pripravi kompleta za odkrivanje antigena.
2. Trenutno so reagenti za neposredno odkrivanje novega koronavirusa še vedno v fazi raziskav in razvoja. Zato noben komplet za odkrivanje antigena ni bil klinično potrjen in komercialno na voljo. Čeprav so že poročali, da je diagnostično podjetje v Shenzhenu razvilo komplet za odkrivanje antigena in klinično testirano v Španiji, zanesljivosti in natančnosti testov ni bilo mogoče potrditi zaradi prisotnosti vprašanj kakovosti reagenta. Do danes NMPA (nekdanja Kitajska FDA) še ni odobrila nobenega kompleta za odkrivanje antigena za klinično uporabo. Za zaključek so bile razvite različne metode odkrivanja. Vsaka metoda ima svoje prednosti in omejitve. Rezultati različnih metod se lahko uporabijo za preverjanje in dopolnitev.
3. Izdelava kakovostnega testnega kompleta CoVID-19 je močno odvisna od optimizacije med raziskavami in razvojem. LIMING BIO-PRODET CO, LTD. Za izpolnjevanje strogih standardov proizvodnje in nadzora kakovosti so potrebni testni kompleti, da zagotovijo najvišjo stopnjo zmogljivosti in doslednosti. Znanstveniki v Liming Bio-Product Co., Ltd. imajo več kot dvajset let izkušenj z oblikovanjem, testiranjem in optimizacijo in vitro diagnostičnih kompletov, da se zagotovi najvišja stopnja učinkovitosti pri analitični kvantifikaciji.
Med pandemijo Covid-19 se je kitajska vlada soočila z velikim povpraševanjem po materialih za preprečevanje epidemije v mednarodnih žariščih. 5. aprila je na tiskovni konferenci Skupnega mehanizma za preprečevanje in nadzorovanje državnega sveta "krepitev kakovosti upravljanja medicinskih materialov in urejanje reda trga" Jiang Fan, inšpektor prve stopnje ministrstva za zunanje trgovine ministrstva Trgovina, je dejal: "Nato bomo svoja prizadevanja usmerili na dva vidika, najprej bomo pospešili podporo več medicinskih potrebščin, ki jih potrebuje mednarodna skupnost, in tudi za izboljšanje nadzora kakovosti, urejanja in upravljanja izdelkov. Kitajska bomo prispevali k skupnemu odzivanju na globalno epidemijo in gradnjo skupnosti s skupno prihodnostjo za človeštvo.
Slika 5:Nova CORONAVIRUS REAGENT LIMING BIO-PRODUCTS Co., Ltd., je pridobil potrdilo o registraciji EU CE
Častni certifikat
Houshenshan
Slika 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. je podprl gorsko bolnišnico Wuhan Vulcan (Houshenshan), da bi se boril proti epidemiji Covid-19 in prejel častno potrdilo o Rdečem križu Wuhan. Wuhan Vulkan Mountain Hospital je najbolj znana bolnišnica na Kitajskem, ki je specializirana za zdravljenje hudih kovida - 19 bolnikov.
Ko se roman koronavirus še naprej širi po vsem svetu, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. krepi, da bi podprl in pomagal skupnostim po vsem svetu z našimi inovativnimi tehnologijami za boj proti tej brez primere globalne grožnje. Hitro testiranje okužbe s kovidom-19 je ključni del reševanja te grožnje. Še naprej pomembno prispevamo z zagotavljanjem kakovostnih diagnostičnih platform v roke zdravstvenih delavcev v prvi vrsti, da bodo ljudje lahko prejeli kritične rezultate testiranja, ki jih potrebujejo. Prizadevanja Liming Bio-Products Co., Ltd. v boju proti Covid-19 pandemiji bodo prispevali naše tehnologije, izkušnje in strokovno znanje mednarodnim skupnostim za gradnjo globalne skupnosti usode.
Long Press ~ skenirajte in sledite nam
E -poštni: sales@limingbio.com
Spletna stran: https://limingbio.com
Čas objave: maj-01-2020
