Katera je najboljša metoda?
—Testi za diagnozo okužbe SARS-CoV-2
Za potrjene primere COVID-19 so poročali, da so pogosti klinični simptomi vročina, kašelj, mialgijo ali utrujenost. Kljub temu ti simptomi niso edinstvene značilnosti COVID-19, ker so ti simptomi podobni kot pri drugih virus okuženih z boleznijo, kot je gripa. Trenutno so virusna nukleinska kislina PCR v realnem času (RT-PCR), CT slikanje in nekateri parametri hematologije glavno orodje za klinično diagnozo okužbe. Kitajski CDC je bilo razvitih in uporabljenih številnih laboratorijskih testnih kompletov in uporabljenih pri testiranju vzorcev bolnikov za Covid-191, ZDA CDC2in druga zasebna podjetja. Test protiteles IgG/IGM, serološka metoda testa, je bila dodana tudi kot diagnostična merila v kitajski posodobljeni različici smernic za diagnozo in zdravljenje za novo koronavirusno bolezen (Covid-19), ki je bila izdana 3. marec.1. RT-PCR test virusne nukleinske kisline je še vedno trenutna standardna diagnostična metoda za diagnozo COVID-19.
StrongStep®Nov Coronavlrus (SARS-CoV-2) multipleksni PCR komplet v realnem času (odkrivanje za tri gene)
Kljub temu ti testni kompleti PCR v realnem času, ki iščejo genetski material virusa, na primer v nosnem, oralnem ali analnem brisu, trpijo zaradi številnih omejitev:
1) Ti testi imajo dolge prelomne čase in so zapleteni pri delovanju; Na splošno trajajo v povprečju več kot 2 do 3 ure, da ustvarijo rezultate.
2) PCR testi potrebujejo certificirane laboratorije, drago opremo in usposobljene tehnike.
3) Obstaja nekaj števila lažnih negativnosti za RT-PCR Covid-19. To je lahko posledica nizke virusne obremenitve SARS-Cov-2 v vzorcu zgornjega dihalnega brisa (novi koronavirus v glavnem okuži spodnji dihalni trakt, kot so pljučni alveoli), test očistili virus iz svojih teles.
Raziskave Lirong Zou et al4ugotovili, da so bile kmalu po začetku simptomov odkrite večje virusne obremenitve, z večjimi virusnimi obremenitvami v nosu kot v grlu, in vzorec virusne nukleinske kisline pri bolnikih, okuženih s SARS-Cov-2, spominja na bolnike z gripo4in se zdi, da se razlikuje od tistega, ki ga opazimo pri bolnikih, okuženih s SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5Pregledane serijske vzorce (brisi grla, sputum, urin in blato) pri dveh bolnikih v Pekingu in ugotovili, da so virusne obremenitve v vzorcih brisa in sputa v grlu dosegli približno 5–6 dni po začetku simptomov, vzorci sputuma so na splošno pokazali večje virusne obremenitve kot Vzorci brisa grla. V vzorcih urina ali blata pri teh dveh bolnikih niso odkrili virusne RNA.
PCR test daje pozitiven rezultat le, ko je virus še vedno prisoten. Testi ne morejo prepoznati ljudi, ki so šli skozi okužbo, si opomogli in očistili virus iz svojih teles. V dejavno je bilo le približno 30% -50% pozitivnih za PCR pri bolnikih s klinično diagnosticirano novo koronavirusno pljučnico. Številni novih bolnikov s koronavirusno pljučnico ni mogoče diagnosticirati zaradi negativnega testa nukleinske kisline, zato ustrezne zdravljenja ne morejo pravočasno dobiti. Od prve do šeste izdaje smernic, ki se opirajo izključno na podlagi diagnoze rezultatov testa nukleinske kisline, kar je klinikom povzročilo velike težave. Najzgodnejši "žvižgač", dr. Li Wenliang, oftalmolog v Wuhan Central Bolnišnica, je mrtva. V času svojega življenja je imel tri teste nukleinske kisline v primeru vročine in kašlja, zadnjič pa je dobil pozitivne rezultate PCR.
Po razpravi strokovnjakov je bilo odločeno, da se metode testiranja v serumu povečajo kot novo diagnostično merilo. Medtem ko testi protiteles, imenovani tudi serološki testi, lahko potrdijo, ali je bil nekdo okužen tudi potem, ko je njihov imunski sistem očistil virus, ki povzroča Covid-19.
StrongStep® SARS-CoV-2 IgG/IGM protitelesa hitri test
Test protiteles IgG/IGM bo pomagal izslediti na veliko bolj populacijski način, ki je imel okužbo, saj se zdi, da se številni primeri širijo od asimptomatskih bolnikov, ki jih ni mogoče zlahka prepoznati. Par v Singapurju, mož, ki je pozitivno testiral s PCR, je bil rezultat testa PCR njegove žene negativen, vendar so rezultati testov protiteles pokazali, da ima protitelesa, kot tudi njen mož.
Serološke teste je treba skrbno potrditi, da se prepričate, ali reagirajo zanesljivo, vendar le na protitelesa proti novemu virusu. Skrbi je, da bi podobnost med virusi, ki povzročajo hud akutni dihalni sindrom in CoviD-19, lahko privedla do navzkrižne reaktivnosti. IgG-IGM, ki jo je razvil Xue Feng Wang6je veljalo, da se lahko uporablja kot test oskrbe (POCT), saj ga je mogoče izvesti v bližini postelje s krvjo prstov. Komplet ima občutljivost 88,66% in specifičnost 90,63%. Vendar so bili še vedno lažno pozitivni in lažno negativni rezultati.
V kitajski posodobljeni različici smernice za diagnozo in zdravljenje za novo koronavirusno bolezen (Covid-19)1, potrjeni primeri so opredeljeni kot osumljeni primeri, ki izpolnjujejo katero koli od naslednjih meril:
(1) vzorci dihalnih poti, vzorci krvi ali blata, ki so pozitivni na nukleinsko kislino SARS-CoV-2 z uporabo RT-PCR;
(2) genetsko sekvenciranje virusa iz vzorcev dihalnih trakta, krvi ali blata je zelo homologno z znanim SARS-CoV-2;
(3) Nova serumska nova koronavirusno specifična protitelesa IgM in protitelesa IgG sta bila pozitivna;
(4) Nova serumska nova koronavirusno specifična protitelesa IgG, spremenjena iz negativnega v pozitivno ali koronavirusno specifično protitelesa IgG v obdobju okrevanja, je 4-krat večja kot v akutnem obdobju.
Diagnoza in zdravljenje CoVID-19
| Smernice | OBOLJEN | Potrjena diagnostična merila |
| Različica 7. | 3MAR.2020 | ❶ PCR ❷ ngs ❸ IgM+IgG |
| Različica 6. | 18. februarja 2020 | ❶ PCR ❷ ngs |
Sklic
1. smernice za diagnozo in zdravljenje nove koronavirusne pljučnice (preizkusna različica 7, Nacionalna zdravstvena komisija Ljudske republike Kitajske, izdana ob 3.Mar.2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/A31191442E29474B98BFED5579D5AF95.shtml
2. Raziskave uporabljajo samo protokol RT-PCR v realnem času za identifikacijo 2019-NCOV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur trdi, da je prva uporaba testa protiteles za sledenje okužb koronavirusa
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-ase-antibady-test-track-coronavirus-infections
4.SARS-COV-2 virusna obremenitev pri zgornjih dihalnih vzorcih okuženih bolnikov 19.2020 DOI: 10.1056/NEJMC2001737
5.Viralloads SARS-CoV-2 v kliničnih vzorcih Lancet Infect Dis 2020 Objavljeno na spletu 24. februarja 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Razvoj in klinična uporaba hitrega testa s kombiniranim protitelesom IGM-IGG za SARS-CoV-2
Diagnoza okužbe Xuefeng Wang Orcid ID: 0000-0001-8854-275X
Čas objave: MAR-17-2020
